在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在zui恰當(dāng)?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線，觀察這種沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系，可作出對抗原或抗體的定性分析。雙向擴(kuò)散也可分為試管法和平板法。

（一）試管法
試管法由Oakley首先報(bào)道。先在試管中加入含抗體的瓊脂，凝固后在中間加一層普通瓊脂，冷卻后將抗原液體加到上層。放置后，下層的抗體和上層的抗原向中間瓊脂層內(nèi)自由擴(kuò)散，在抗原與抗體濃度比例恰當(dāng)處形成沉淀線。此法分析效果與Oudin法相似，在臨床檢驗(yàn)中罕用。

（二）平板法
平板法由Ouchterlony首先報(bào)道，是抗原抗體鑒定的zui基本方法之一。該法的基本步驟是：在瓊脂板上相距3—5mm打一對孔，或者打梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相對的孔中加入抗原或抗體，置室溫或37C環(huán)境中，18—24h后，凝膠中各自擴(kuò)散的抗原和抗體可在濃度比例適當(dāng)處形成可見的沉淀線。根據(jù)沉淀線的形態(tài)和位置等可作如下4種分析。