（1）IL-17的誘導(dǎo)：取人PBMC或純化的CD4+T細(xì)胞，加入誘導(dǎo)劑（PMA 5ng／mL+ionomycin 3ug／mL，或ConA 63ug／mL，或抗CD28抗體+CD3抗體），37℃孵育48—72h。收集培養(yǎng)上清液檢測IL-17含量（ELISA法）或生物學(xué)活性。

 

    （2）IL-17生物學(xué)活性檢測：通過誘導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞或腎癌上皮細(xì)胞株（TUMT或CHA）產(chǎn)生IL-6、IL-8或GM-CSF可以檢測IL-17的活性。

 

    1）滑膜細(xì)胞的制備：外科切取關(guān)節(jié)滑膜，剪碎后用4ug／mL膠原酶消化，37~C孵育2～3h，單個細(xì)胞懸液用培養(yǎng)液培養(yǎng)。細(xì)胞貼壁后，洗去未粘附細(xì)胞。待細(xì)胞生長至匯合，用*消化傳代。一般采用3—8代的滑膜成纖維樣細(xì)胞作為檢測用靶細(xì)胞。

 

    2）取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔依次加人104滑膜細(xì)胞或是TUMT細(xì)胞（或CHA細(xì)胞），不同稀釋度的IL-17待測樣品，總體積為200uL，置370（2 5％C02溫箱中孵育48h，收集上清，置-20℃保存以備檢測細(xì)胞因子活性。用ELISA法或生物學(xué)活性測定法檢測上清液中的II-6、IL-8或GM-CSF等細(xì)胞因子的含量或活性，以此推測IL-17的活性。